生物化学测定为了保证测定结果的准确性,避免时间和材料的损失,正式试验前务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,并制作标准曲线;根据预测定结果确认是否需要调整样本量、提取过程中料液比是否需要调整、标准线性是否满足要求等。预实验结果评价过程中的任何问题均可与专属技术专员联系。
生物化学测定通常采用玻璃或石英两种材质的比色皿:紫外分光光度法通常使用石英比色皿(口沿处有标有Q),可见分光光度法通常使用玻璃比色皿(口沿处有标有G);按说明书要求使用1mL玻璃/石英比色皿(光径=1cm)、200μL微量玻璃/石英比色皿(光径=1cm)、普通/UV微孔板(光径=0.5cm)。
不同样品测定值差异不显著:
1、该指标在不同样品间确实无差异;
2、操作重复性不佳,掩盖了组内和组间差异:建议进行重复试验,若重复之间吸光度变化差异较大,表明可能是由于操作不规范造成的,应注意加液体积是否准确和反应时间控制是否准确等。
测定管与对照管差异不显著:
1、首先需确认反应是否进行:检查标准组吸光值是否正常、试剂配制是否正常、提取过程是否正常、试剂添加顺序是否正确等;
2、样本中待测物含量或酶活较低:适当增加样本量或将样本浓缩后再进行测定;注意:测定酶活时若需要使用灭活酶液,需检查是否灭活充分,可适当延长粗酶液灭活时间或更改粗酶液灭活方式。