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你知道含量试剂盒怎么用吗?

发布时间: 2022-02-22  点击次数: 179次
  含量试剂盒提供了一种简单方便的方案检测样品中亚铁和/或铁离子。检测时,载铁蛋白在酸性缓冲液中把高价铁溶解溶液里。然后将其还原成亚铁离子,FereneS与铁反应产生一种稳定的化合物,593nm处有吸收峰。缓冲液中有一种特殊的螯合物消除Cu2+的干扰。试剂盒检测线性范围为50ul样品中0.4-20nmol,或者铁浓度在8uM-400uM之间的各种生物样品。
 
  铁是动物和人体生长发育所必需的微量元素之一。其在机体中参与机体能量代谢、载体组成、转运和贮存营养素及机体免疫机能,是机体生化反应中多种酶的重要组分及活化因子。铁在体内主要以金属络合蛋白、亚铁血红素以及载氧蛋白的形式存在。无机铁也参与到氧化还原反应中许多酶的铁硫簇里,比如固氮酶和氢化酶。
 
  含量试剂盒操作步骤:
 
  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 
  2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
 
  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
 
  4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 
  5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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