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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒

简要描述:二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒是植物光合作用中固定 CO2 的关键酶,同时参与植物光呼吸代谢途径,制约着碳素向Calvin 循环和光呼吸循环分流,作为一种能够催化羧化反应和加氢反应的双功能酶,其活性的大小对光合速率的研究具有重要意义。

产品型号: AKPL001U-1

所属分类:氧化与抗氧化系列

更新时间:2021-11-17

厂商性质:生产厂家

详情介绍
品牌BOXBIO/盒子生工货号AKPL001U-1
规格25/24S供货周期现货
主要用途二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒应用领域医疗卫生,环保,食品,生物产业,制药
检测设备紫外分光光度计可检测样本数24 Samples
主要检测设备及配套紫外分光光度计/1 mL石英比色皿(d=10 mm)预计测定时间3 h (25 Samples)
试剂储存条件按照标签要求储存需自备试剂
检测方法 NADH速率法检测波长340 nm
信号响应递增型
  • Rubisco可催化核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)和CO2结合生成3-磷酸甘油酸,3-磷酸甘油酸可进一步在3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的催化作用下生成甘油醛-3-磷酸,反应过程中伴随着NADH氧化生成NAD+,NADH在340 nm处有特征吸收峰,通过测定340 nm处吸光度的下降速率即可表征Rubisco活性。

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  • 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒测定过程中所需要的仪器和试剂:紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿、恒温水浴/培养箱、台式 离心机、可调式移液器、研钵/匀浆器和蒸馏水。

  • 样品处理 细菌或细胞:离心收集细菌或细胞到离心管内,按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL为(500-1000):1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1 mL 提取液)处理样品,冰浴超声破碎细菌 或细胞(功率 20%200 W,超声 3 s,间隔 10 s,重复 30 次),4℃ 10000 g 离心 10 min,取上清置 于冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:(5-10)的比例(建议称取约 0.1 g 组织, 加入 1 mL 提取液)处理样品,冰浴匀浆,4℃ 10000 g 离心 10 min,取上清置于冰上待测。

  • 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性检测试剂盒吸光值测定:立即混匀放入 25℃水浴或培养箱中并开始计时,测定 20 s(总时间)时 340 nm 处吸光值,记为 A1 测定和 A1 空白;准确反应 300 s,测定 320 s(总时间)时 340 nm 处吸光值, 记为 A2 测定和 A2 空白;计算 ΔA 测定=A1 测定-A2 测定,ΔA 空白=A1 空白-A2 空白,ΔA=ΔA -ΔA 空白。注:空白组只需测定 1-2 次;准确在 20 s 320 s 处完成读数,以保证实验结果的准确。






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